检测范围
非靶向LC-HRMS尽可能采集样品中的离子特征，经峰提取、对齐、空白过滤、批次校正和统计寻找差异物；代谢组进一步结合池质控、随机进样和结构注释。项目交付特征矩阵、统计模型、差异峰、注释置信等级和原始数据。
全特征提取
从高分辨数据提取m/z、保留时间、峰面积和同位素/加合物信息。
对象与条件
食品、环境、材料和生物样中的未知化学差异与污染特征筛查。 血浆、尿液、组织、细胞和发酵样的非靶向代谢组。 正常异常、处理对照、时间序列和多批次样本的化学指纹比较。 产品配方、降解、迁移物和工艺副产物的差异特征发现。 后续靶向方法所需候选物、离子对和浓度范围筛选。
需要注意的限制
非靶向筛查与代谢组结果报告对应实际样品、测点、量程和测量条件；整批评价按照约定取样方案、对照设置和判定依据执行 非靶向筛查与代谢组结果谱库匹配形成候选识别，标准品或互补技术用于确证；结果复核同步检查共洗脱、同分异构体、离子抑制、荧光背景、溶剂和前处理损失。 非靶向筛查与代谢组结果对应实际收到的样品、采用的液相色谱质谱 LC-MS条件和数据处理方法；样品或参数改变后按新条件复核可比性 仪器测试交付测量数据和技术说明；整批质量判定、产品认证、法定鉴定和监管事项按照相应程序实施
检测时需要注意什么
实施流程
1. 完成研究设计、随机化和样本清单，统一采样、淬灭、保存与提取；2. 建立LC-HRMS序列，以池QC平衡系统并穿插监测响应和保留时间；3. 执行峰提取、去同位素、加合物归并、对齐、缺失处理和批次校正；4. 运行探索统计和差异分析，检查QC聚集、模型过拟合和多重检验；5. 对差异特征分级注释并复验重点候选，交付可重分析矩阵
特征不等于化合物
一个分子可产生多个离子特征，归并加合物和同位素后再进行化合物计数。
监督模型
PLS-DA等模型容易过拟合，必须通过置换、交叉验证和独立数据审查。
注释等级
标准品匹配、库谱匹配、分子式和化学类别推断采用不同置信级，不将预测名称写成确证。
批次效应
进样顺序、离子源污染和柱状态会形成系统差异，随机化和池QC用于识别与校正。
适用产品与样品
非靶向筛查与代谢组适用于以下产品、样品及技术问题。
适用产品和常见问题
- 食品、环境、材料和生物样中的未知化学差异与污染特征筛查。
- 血浆、尿液、组织、细胞和发酵样的非靶向代谢组。
- 正常异常、处理对照、时间序列和多批次样本的化学指纹比较。
- 产品配方、降解、迁移物和工艺副产物的差异特征发现。
- 后续靶向方法所需候选物、离子对和浓度范围筛选。
送样前需要准备什么
送样信息包括材质、形态、批次、保存条件、目标参数及制样要求。
- 01
研究设计在采样前固定分组、数量、随机化、时间点和排除规则。
- 02
生物样快速淬灭并低温保存，统一冻融、提取比例和内标。
- 03
每组设置过程空白、溶剂空白和混合池质控，池QC按序列穿插。
- 04
正常异常或处理对照采用相同容器、保存、提取和上机批次。
- 05
样本量大时采用区组随机与桥接质控，记录批次和仪器维护节点。
研究设计在采样前固定分组、数量、随机化、时间点和排除规则。 生物样快速淬灭并低温保存，统一冻融、提取比例和内标。 每组设置过程空白、溶剂空白和混合池质控，池QC按序列穿插。 正常异常或处理对照采用相同容器、保存、提取和上机批次。 样本量大时采用区组随机与桥接质控，记录批次和仪器维护节点。
原始高分辨数据和预处理参数。 过滤后的m/z—保留时间—峰面积矩阵。 QC趋势、PCA及经验证的差异统计。 差异特征、MS/MS和注释置信等级表。 候选通路、化学类别及重点峰复验建议。
检测项目
全特征提取
从高分辨数据提取m/z、保留时间、峰面积和同位素/加合物信息。
空白与QC过滤
删除空白主导、重复性差和漂移不可校正的特征。
多变量统计
使用PCA观察总体结构，以经验证监督模型和单变量统计筛选差异。
代谢物注释
依据准确质量、MS/MS、保留时间和标准品分配不同置信等级。
通路与类别
将可靠注释映射至代谢通路或化学类别，保留数据库版本。
候选物复验
对重点差异峰采用标准品、靶向MS/MS或三重四极杆方法完成独立复验。
检测方法和流程
检测标准和方法
以下是本页引用的标准与方法资料。具体项目是否适用、采用哪个版本及如何判定，需结合对象、条件和委托要求确认。
共 2 项
非靶向筛查与代谢组的方法选择、样品处理、仪器条件、质量控制和结果表达应与采用标准的适用范围保持一致。
GB/Z 35959-2018《液相色谱-质谱联用分析方法通则》可作为该分析方法的质量要求参考，项目按客户指定版本和实验室确认结果执行。
GB/Z 35959-2018—液相色谱-质谱联用分析方法通则非靶向筛查与代谢组的方法选择、样品处理、仪器条件、质量控制和结果表达应与采用标准的适用范围保持一致。
ISO 21253-1:2019《水中目标化合物 GC-MS/LC-MS 鉴定准则》可作为该分析方法的质量要求参考，项目按客户指定版本和实验室确认结果执行。
ISO 21253-1:2019—水中目标化合物 GC-MS/LC-MS 鉴定准则报告和检测数据
非靶向筛查与代谢组结果报告对应实际样品、测点、量程和测量条件；整批评价按照约定取样方案、对照设置和判定依据执行
非靶向筛查与代谢组结果谱库匹配形成候选识别，标准品或互补技术用于确证；结果复核同步检查共洗脱、同分异构体、离子抑制、荧光背景、溶剂和前处理损失。
非靶向筛查与代谢组结果对应实际收到的样品、采用的液相色谱质谱 LC-MS条件和数据处理方法；样品或参数改变后按新条件复核可比性
仪器测试交付测量数据和技术说明；整批质量判定、产品认证、法定鉴定和监管事项按照相应程序实施
常见问题
01非靶向分析能发现样品里的所有化合物吗？
不能，提取、色谱、离子化和浓度范围决定可见特征，报告说明实际覆盖的化学空间。
02一个离子特征就是一种代谢物吗？
不是，一个分子会产生同位素、加合物和碎片，需归并并经结构证据注释。
03为什么代谢组需要池质控样？
池QC代表样本总体并穿插进样，用于监测漂移、重复性和批次校正。
04PCA和PLS-DA有什么区别？
PCA不使用分组观察自然结构，PLS-DA使用分组监督分类，后者必须严格验证过拟合。
05数据库给出的名称可以直接确证吗？
数据库仅提供候选，标准品的保留时间与MS/MS一致才能达到更高确认等级。
06样本数量太少会有什么影响？
统计功效下降且容易把个体差异当组间差异，研究设计会结合变异和效应量安排数量。
07缺失峰可以全部填成零吗？
不能简单处理，先判断低于检出、峰提取失败或随机缺失，再采用适当规则并记录。
08发现差异峰后怎样转成可报告浓度？
购买或制备标准品，开发靶向校准和质控方法，再由LC-MS/MS进行定量。