检测范围
大分子、寡核苷酸与生物分析主要检测完整分子量、肽图与序列覆盖，服务对象包括蛋白质和多肽的完整分子量、肽图、序列覆盖与修饰筛查、寡核苷酸、siRNA和相关产品的分子量、杂质和降解物分析，覆盖来样登记、检测实施和报告交付。
完整分子量
对多电荷包络去卷积，获得蛋白、多肽或寡核苷酸分子量及主要变体。
蛋白质和多肽的完整分子量、肽图、序列覆盖与修饰筛查。
寡核苷酸、siRNA和相关产品的分子量、杂质和降解物分析。
样品、目标参数和报告用途
蛋白与肽样低温保存，记录缓冲盐、浓度、还原烷基化、冻融和蛋白酶抑制。
大分子、寡核苷酸与生物分析检测报告 + 检测数据与图表
原始质谱、去卷积谱和完整分子量。
项目技术要点
实施流程
1. 依据完整质量、序列、杂质或定量目标选择前处理、色谱和质谱平台；2. 制备低吸附样品，蛋白项目完成变性、还原、烷基化和受控酶解；3. 运行系统适用性、空白、参考品和质控，采集高分辨MS/MS或靶向MRM；4. 执行去卷积、数据库检索、假发现率、修饰定位或校准曲线审查；5. 汇总分子量、序列覆盖、变体或浓度，并保存原始文件与搜索参数
大分子吸附
低浓度蛋白、肽和核酸会吸附在普通塑料或玻璃表面，容器和添加剂经过回收验证。
肽段假发现率
数据库检索采用目标—诱饵等策略控制错误匹配，单肽和修饰位点另行审查。
离子对记忆
寡核苷酸常用离子对试剂，会改变LC-MS系统状态并产生记忆，采用专用流路和清洗。
去卷积结果
去卷积分子量依赖电荷分布、信噪和算法，报告同时保留原始m/z包络。
适用产品与样品
大分子、寡核苷酸与生物分析适用于以下产品、样品及技术问题。
适用产品与技术问题
- 蛋白质和多肽的完整分子量、肽图、序列覆盖与修饰筛查。
- 寡核苷酸、siRNA和相关产品的分子量、杂质和降解物分析。
- 血浆、血清、尿液和组织中药物、肽或标志物的靶向定量。
- 生物制品生产中的宿主残留、过程杂质和批次一致性研究。
- 抗体、偶联物和核酸药物的连接、氧化、脱酰胺等结构变体。
样品与委托资料
送样信息包括材质、形态、批次、保存条件、目标参数及制样要求。
- 01
蛋白与肽样低温保存，记录缓冲盐、浓度、还原烷基化、冻融和蛋白酶抑制。
- 02
寡核苷酸使用低吸附容器，注明序列、修饰、盐型、纯度和保存溶剂。
- 03
生物基质样按采血、抗凝、离心和冻结时限统一处理并记录溶血。
- 04
酶解项目配置空白、参考蛋白和过程质控，控制酶比、时间、pH和温度。
- 05
定量项目使用稳定同位素内标或适配替代基质，并验证吸附与稳定性。
蛋白与肽样低温保存，记录缓冲盐、浓度、还原烷基化、冻融和蛋白酶抑制。样品量包含制样损耗、平行样和留样需求。
大分子、寡核苷酸与生物分析列明样品、项目、方法、开始时间与报告交付日期，并同步安排复杂前处理和多模块测试。
主要提供原始质谱、去卷积谱和完整分子量、肽段清单、序列覆盖和MS/MS证据。其他数据和附件在委托单中列明。
收样、制样、测试、数据复核和报告输出由项目负责人统一衔接。
检测项目
完整分子量
对多电荷包络去卷积，获得蛋白、多肽或寡核苷酸分子量及主要变体。
肽图与序列覆盖
酶解后以LC-MS/MS鉴定肽段，映射序列并统计覆盖率。
翻译后修饰
定位氧化、脱酰胺、糖基化和其他质量偏移，并用碎片谱支持位点。
寡核苷酸杂质
分离n-1、n+1、未完全脱保护和降解物，结合准确质量归属。
生物基质定量
使用内标、基质校准和质控样测定药物或标志物浓度。
稳定性产物
在温度、光照或冻融条件下比较主峰、分子量和修饰变化。
检测方法与实施流程
检测需求
围绕大分子、寡核苷酸与生物分析列明样品、目标参数、方法标准和报告用途。
样品登记
蛋白与肽样低温保存，记录缓冲盐、浓度、还原烷基化、冻融和蛋白酶抑制。
完成前处理或制样
根据大分子、寡核苷酸与生物分析和完整分子量、肽图与序列覆盖的测试条件处理样品。
完成仪器测试
使用大分子、寡核苷酸与生物分析按规定参数完成完整分子量、肽图与序列覆盖和过程质量控制。
复核检测数据
重点检查完整分子量、肽图与序列覆盖对应的图谱、曲线、图像或数据表。
交付报告和附件
提供原始质谱、去卷积谱和完整分子量、肽段清单、序列覆盖和MS/MS证据。及约定附件。
标准与方法依据
以下列出大分子、寡核苷酸与生物分析采用的正式标准与执行依据，包含标准编号、适用项目和发布来源。
共 2 项
大分子、寡核苷酸与生物分析的方法选择、样品处理、仪器条件、质量控制和结果表达应与采用标准的适用范围保持一致。
GB/Z 35959-2018《液相色谱-质谱联用分析方法通则》可作为该分析方法的质量要求参考，项目按客户指定版本和实验室确认结果执行。
GB/Z 35959-2018—液相色谱-质谱联用分析方法通则大分子、寡核苷酸与生物分析的方法选择、样品处理、仪器条件、质量控制和结果表达应与采用标准的适用范围保持一致。
ISO 21253-1:2019《水中目标化合物 GC-MS/LC-MS 鉴定准则》可作为该分析方法的质量要求参考，项目按客户指定版本和实验室确认结果执行。
ISO 21253-1:2019—水中目标化合物 GC-MS/LC-MS 鉴定准则报告与交付内容
报告列明实际样品、检测方法、测试条件、结果和约定附件。
报告同步提供质量控制、数据复核和判定依据等项目记录。
样品、批次、工况或标准发生变化时，按新条件开展补充检测。
报告支持CMA/CNAS标识、合格判定及英文版本，相关要求可在需求表中注明。常见问题
01完整分子量和肽图有什么区别？
完整质量显示整体分子量与大变体，肽图将蛋白酶解后提供序列和局部修饰信息。
02肽图覆盖率不到百分之百正常吗？
某些肽段过短、过长、疏水或离子化弱，覆盖率结合未覆盖区域和目标位点评价。
03MS/MS怎样定位蛋白修饰位点？
含修饰肽的碎片离子系列在特定残基处显示质量偏移，并结合定位概率审查。
04寡核苷酸为什么需要专用LC-MS流路？
离子对试剂容易吸附并影响其他方法，专用流路可控制记忆和交叉污染。
05低浓度多肽为什么容易丢失？
会吸附容器和管路或被蛋白酶降解，使用低吸附耗材、内标和稳定剂监控回收。
06生物基质定量为什么需要基质校准？
血浆或组织共提取物会产生离子抑制，基质标准和同位素内标用于校正。
07去卷积后的单一质量就是唯一结构吗？
相同整体质量可能对应不同修饰位置，需要肽图、碎片谱或其他结构证据区分。
08冻融会改变蛋白和寡核苷酸结果吗？
反复冻融会促使聚集或降解，稳定性研究确定允许次数并记录样品实际经历。