检测范围
面向核酸样品、病原体、细胞和基因工程产品，开展核酸提取、定性定量PCR、数字PCR、Sanger或高通量测序、序列比对、拷贝数和基因表达分析。报告记录样品来源、提取批、引物探针、扩增曲线、测序质量、分析流程和变异结果。
核酸提取与质量评价
测定核酸浓度、纯度、完整性和抑制情况，记录提取批次及回收率。
对象与条件
DNA、RNA和核酸提取物 细胞、组织、微生物和环境样本 质粒、载体及基因工程产品 病原体、遗传变异和表达分析样本
需要注意的限制
引物覆盖、核酸降解和污染可能影响结果，未检出不等同于样品绝对不存在目标物。 微生物和分子结果受取样、保存、基质、培养或引物覆盖影响；实验室结果应结合生产、临床或流行病学资料解释 微生物、细胞与分子生物学结论对应受检样品、约定区域或班次、规定条件和已核对资料，报告记录抽样、保存运输、工况、数据来源和标准版本 微生物、细胞与分子生物学出现配方、材料来源、工艺、批次、使用环境、法规、目标市场或检查目的变更时，按变更内容更新样品和项目组合
检测时需要注意什么
实施流程
1. 按样本来源、目标序列和采集时间建立分析批，设置提取空白、无模板、阳性和内参对照；2. 完成核酸提取后测定浓度、纯度、完整性和抑制情况，再分配至PCR、数字PCR或测序流程；3. 定性定量PCR保存循环阈值、扩增曲线和标准曲线，测序项目记录文库批次、读长、质量值与覆盖深度；4. 使用锁定的参考序列、数据库和分析参数完成比对、定量与变异注释，汇总对照结果和样本结论
前后扩增区域分开
试剂配制、样品处理、扩增和产物分析分区进行，流向及清洁记录随批保存。
对照覆盖全流程
提取空白、无模板、阳性和内参对照从提取到分析共同运行，异常不删除。
分析版本可复现
参考基因组、数据库、软件、参数和脚本版本记录完整，原始数据只读保存。
适用产品和使用场景
PCR、测序与分子生物学适用于以下产品、业务阶段和质量问题。
适用产品和常见问题
- DNA、RNA和核酸提取物
- 细胞、组织、微生物和环境样本
- 质粒、载体及基因工程产品
- 病原体、遗传变异和表达分析样本
样品和资料要求
提交产品阶段、目标市场、样品批次、技术规范、已有数据和当前质量问题。
- 01
按来源和时间点编号的原始样本
- 02
提取核酸、质粒和标准物质
- 03
阳性、阴性、空白和无模板对照
- 04
引物探针、目标序列和分析需求资料
按来源和时间点编号的原始样本 提取核酸、质粒和标准物质 阳性、阴性、空白和无模板对照 引物探针、目标序列和分析需求资料
定性与定量PCR技术结果表 Sanger与高通量测序与序列比对与变异分析数据附件 核酸提取与质量评价计算和结果摘要 前后扩增区域分开追溯资料
检测与分析项目
核酸提取与质量评价
测定核酸浓度、纯度、完整性和抑制情况，记录提取批次及回收率。
定性与定量PCR
保存循环阈值、扩增曲线、熔解曲线和标准曲线，计算目标存在及拷贝数。
数字PCR与绝对定量
根据有效微滴或分区和阳性比例计算绝对浓度，记录阈值设定。
Sanger与高通量测序
完成文库质量、测序、碱基质量和覆盖统计，输出原始序列及质控数据。
序列比对与变异分析
按冻结的参考序列和流程完成比对、注释、变异筛选及结果复核。
检测流程
标准与技术依据
以下是本页引用的标准与方法资料。具体项目是否适用、采用哪个版本及如何判定，需结合对象、条件和委托要求确认。
共 3 项
药品、药包材、医疗器械材料及生物学相关项目应按照产品预期用途、风险管理、质量标准、方法适用性和样品代表性确认技术路径。
检测或验证是否可用于注册、放行、变更、风险管理或持续确认，应以产品分类、完整技术文件、有效能力范围、委托协议和监管要求为准。
国家药品监督管理局报告和检测数据
引物覆盖、核酸降解和污染可能影响结果，未检出不等同于样品绝对不存在目标物。
微生物和分子结果受取样、保存、基质、培养或引物覆盖影响；实验室结果应结合生产、临床或流行病学资料解释
微生物、细胞与分子生物学结论对应受检样品、约定区域或班次、规定条件和已核对资料，报告记录抽样、保存运输、工况、数据来源和标准版本
微生物、细胞与分子生物学出现配方、材料来源、工艺、批次、使用环境、法规、目标市场或检查目的变更时，按变更内容更新样品和项目组合
常见问题
01核酸定量、扩增特异性、序列变异和污染控制会输出哪些数据？
结果包括核酸浓度、纯度和完整性，PCR循环阈值与扩增曲线，数字PCR阳性分区和绝对浓度，以及测序质量、覆盖深度、序列比对和变异信息；均对应样本与分析批。
02DNA/RNA样品、引物、参考序列和样本信息怎样对应？
原始样本、提取核酸、质粒、标准物质和各类对照分别编号；引物探针序列、目标区域、参考序列及分析参数关联至同一分析批。
03PCR、测序与分子生物学的核酸提取与质量评价如何采集和计算？
每个提取批记录核酸浓度、A260/A280等纯度指标、完整性图谱、内参响应和回收率，并关联原始样本、提取试剂与洗脱体积。
04PCR、测序与分子生物学的“定性与定量PCR”和“数字PCR与绝对定量”怎样形成完整证据？
实时PCR以循环阈值、扩增或熔解曲线和标准曲线判断目标并计算相对或标准曲线定量；数字PCR以有效分区数和阳性比例计算绝对浓度，两者共享样本与对照编号。
05PCR、测序与分子生物学为什么保留前后扩增区域分开记录？
试剂配制、样品处理、扩增和产物分析分区进行，流向及清洁记录随批保存。
06PCR、测序与分子生物学怎样比较不同样本的Sanger与高通量测序结果？
Sanger结果比较目标区段峰图、碱基判读和一致性，高通量结果比较读数、碱基质量、覆盖深度及变异频率；两类数据统一到同一参考序列和样本编号。
07PCR、测序与分子生物学的序列比对与变异分析包含哪些技术内容？
资料包含参考序列版本、比对与注释软件、参数、覆盖统计、候选变异表、过滤标记和复核证据，变异可回查到原始读段或峰图。
08PCR、测序与分子生物学交付结果怎样服务病原体和目标基因检测？
病原体项目使用扩增与对照结果判读，表达项目使用目标基因和内参数据计算，序列鉴定及工程构建项目使用峰图、读段、比对和变异表确认。