检测范围
采用远紫外、近紫外和可见圆二色光谱分析食品蛋白、多肽、核酸、手性药物、天然产物及日化生物活性组分。远紫外谱用于二级结构组成和温变折叠，近紫外反映芳香残基与三级结构环境；小分子通过Cotton效应、对映镜像和配位诱导CD评价构型及相互作用。
蛋白二级结构
采集远紫外CD并用合适参考集估算α螺旋、β折叠、转角和无规结构组成。
对象与条件
适用于纯化蛋白、多肽、核酸、手性药物、糖类衍生物、天然产物、手性香料及具有CD发色团的活性成分。 蛋白远紫外CD可估算α螺旋、β折叠、转角与无规结构比例，并跟踪温度、pH、盐度和配体作用。 蛋白近紫外CD观察芳香残基和二硫键微环境，结合远紫外谱判断三级与二级结构变化。 手性小分子按摩尔椭圆度、峰符号和对映体镜像谱比较构型、批次和外消旋趋势。 配体滴定与温变序列可描述结合诱导CD、构象转变、熔解温度和折叠可逆性。
需要注意的限制
食品、药品与日化产品圆二色光谱 CD结果报告对应实际样品、测点、量程和测量条件；整批评价按照约定取样方案、对照设置和判定依据执行 食品、药品与日化产品圆二色光谱 CD结果谱库匹配形成候选识别，标准品或互补技术用于确证；结果复核同步检查共洗脱、同分异构体、离子抑制、荧光背景、溶剂和前处理损失。 食品、药品与日化产品圆二色光谱 CD结果对应实际收到的样品、采用的圆二色光谱 CD条件和数据处理方法；样品或参数改变后按新条件复核可比性 仪器测试交付测量数据和技术说明；整批质量判定、产品认证、法定鉴定和监管事项按照相应程序实施
检测时需要注意什么
实施流程
1. 依据蛋白、小分子和吸收范围选择远紫外、近紫外或可见波段及光程，测量缓冲和溶剂基线；2. 样品按准确浓度配制并低速除气泡，检查吸收和探测器高压后采集多次累加CD与吸收谱；3. 温变项目按恒定速率升降温并在关键温区增加测点，滴定项目逐次加样并作体积校正；4. 数据完成基线、浓度光程换算、结构拟合和转变曲线分析，输出批次、温变及结合叠图
远紫外缓冲选择
氯离子、咪唑和部分辅料在短波区吸收强，采用低吸收缓冲并以短光程池保持190 nm附近有效光通量。
结构拟合质量
二级结构比例取决于波长范围、浓度准确度和参考数据库，报告拟合残差、使用算法及谱图质量。
散射与聚集
蛋白聚集会抬高基线并引起谱形失真，吸收、动态光散射或离心前后数据用于识别聚集影响。
适用产品与样品
食品、药品与日化产品圆二色光谱 CD适用于以下产品、样品及技术问题。
适用产品和常见问题
- 适用于纯化蛋白、多肽、核酸、手性药物、糖类衍生物、天然产物、手性香料及具有CD发色团的活性成分。
- 蛋白远紫外CD可估算α螺旋、β折叠、转角与无规结构比例，并跟踪温度、pH、盐度和配体作用。
- 蛋白近紫外CD观察芳香残基和二硫键微环境，结合远紫外谱判断三级与二级结构变化。
- 手性小分子按摩尔椭圆度、峰符号和对映体镜像谱比较构型、批次和外消旋趋势。
- 配体滴定与温变序列可描述结合诱导CD、构象转变、熔解温度和折叠可逆性。
送样前需要准备什么
送样信息包括材质、形态、批次、保存条件、目标参数及制样要求。
- 01
蛋白和多肽使用低吸收缓冲液，注明浓度、纯度、pH、盐、辅料、温度及冻融历史。
- 02
手性药物与天然产物提供构型、分子量和溶剂信息，浓度由准确称量或独立含量数据确定。
- 03
远紫外使用短光程石英池并减少氯离子及高吸收辅料，近紫外可使用较长光程和更高蛋白浓度。
- 04
温变与滴定项目设置缓冲空白、配体空白和未加配体对照，固定升降温速率及平衡时间。
蛋白和多肽使用低吸收缓冲液，注明浓度、纯度、pH、盐、辅料、温度及冻融历史。 手性药物与天然产物提供构型、分子量和溶剂信息，浓度由准确称量或独立含量数据确定。 远紫外使用短光程石英池并减少氯离子及高吸收辅料，近紫外可使用较长光程和更高蛋白浓度。 温变与滴定项目设置缓冲空白、配体空白和未加配体对照，固定升降温速率及平衡时间。
远紫外、近紫外或可见CD与吸收光谱及摩尔或平均残基椭圆度。 蛋白二级结构比例、拟合残差、所用算法和参考数据集记录。 温变熔解、升降温可逆性、配体滴定及冻融批次叠图。 样品浓度、光程、缓冲、温度、扫描参数、基线和重复性数据。
检测项目
蛋白二级结构
采集远紫外CD并用合适参考集估算α螺旋、β折叠、转角和无规结构组成。
三级结构环境
近紫外CD记录芳香残基和二硫键区信号，比较折叠、聚集和配体结合变化。
温变熔解曲线
选择结构敏感波长连续记录椭圆度，计算转变温度、协同性和升降温可逆性。
手性药物Cotton效应
测量小分子峰位、符号和摩尔椭圆度，与对映参照或理论谱进行构型关联。
配体结合诱导CD
随配体比例观察新峰、峰位和强度变化，形成结合或组装滴定曲线。
批次与冻融稳定性
叠加生产批次和冻融循环谱，评价二级结构、三级环境及基线散射变化。
检测方法和流程
检测标准和方法
以下是本页引用的标准与方法资料。具体项目是否适用、采用哪个版本及如何判定，需结合对象、条件和委托要求确认。
共 1 项
谱图检索和未知物判断应保留采集条件、峰表、候选匹配与人工复核过程，不能只交付一个软件给出的名称。
NIST Chemistry WebBook公开提供质谱、红外、紫外可见及色谱保留等经整理的参考数据，可用于谱图与物性信息核对。
NIST Chemistry WebBook报告和检测数据
食品、药品与日化产品圆二色光谱 CD结果报告对应实际样品、测点、量程和测量条件；整批评价按照约定取样方案、对照设置和判定依据执行
食品、药品与日化产品圆二色光谱 CD结果谱库匹配形成候选识别，标准品或互补技术用于确证；结果复核同步检查共洗脱、同分异构体、离子抑制、荧光背景、溶剂和前处理损失。
食品、药品与日化产品圆二色光谱 CD结果对应实际收到的样品、采用的圆二色光谱 CD条件和数据处理方法；样品或参数改变后按新条件复核可比性
仪器测试交付测量数据和技术说明；整批质量判定、产品认证、法定鉴定和监管事项按照相应程序实施
常见问题
01157.1 远紫外和近紫外CD分别看什么？
远紫外主要反映肽键排列和二级结构，近紫外来自芳香残基与二硫键环境，更敏感于三级结构。
02157.2 蛋白CD为什么使用短光程池？
远紫外区缓冲液和肽键吸收强，短光程可降低总吸收，让190至250 nm范围保持有效信噪比。
03157.3 CD能给出蛋白二级结构百分比吗？
利用完整远紫外谱和参考数据库可估算结构比例，报告同时提供波长范围、拟合算法和残差。
04157.4 温变CD怎样获得熔解温度？
选取结构敏感波长记录椭圆度随温度变化，在转变曲线中点或模型拟合参数处得到Tm，并比较升降温。
05157.5 手性药物对映体的CD谱有什么关系？
理想对映体在相同条件下呈峰位一致、符号相反的镜像谱，可用于构型和对映组成比较。
06157.6 高盐缓冲为何影响远紫外数据？
盐和部分缓冲组分增加短波吸收，使探测器高压升高和噪声增加，降低盐度或缩短光程可改善。
07157.7 蛋白聚集如何在CD中表现？
聚集会引起散射、基线倾斜和谱形失真，也可能改变二级结构；结合吸收和粒径数据识别。
08157.8 配体本身有CD信号怎样处理？
测量相同浓度配体空白并作体积校正，结合复合物新峰和滴定趋势分离配体自身与诱导CD。